Rndsystems新產品 CDK008說明書

更新時間：2018-09-30

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Rndsystems R&D Systems

CellXVivo小鼠樹突狀細胞分化試劑盒

CellXVivo Mouse Dendritic Cell Differentiation Kit

CDK008

CellXVivo小鼠樹突細胞分化試劑盒摘要

套件摘要

用于從小鼠骨髓中分化樹突細胞。

主要優點

提供誘導小鼠骨髓細胞未成熟和成熟樹突細胞分化所需的優化試劑
含有高品質的生物活性蛋白質
涉及經過驗證和直接的程序
不需要專門的儀器

為什么離體分化樹突狀細胞？

樹突狀細胞（DC）是先天性和適應性免疫應答的關鍵介質。未成熟的DC表達特異性模式識別受體，其充當表達標志物并允許在感染后捕獲和加工外來抗原。激活后，未成熟的樹突細胞成熟并增加II類MHC和共刺激分子的表達，這對于有效抗原呈遞給幼稚T細胞是重要的。由DC產生的細胞因子也可以促進CD4 + T輔助細胞的分化，作為免疫激活的一部分。CellXVivo ™小鼠樹突細胞分化試劑盒含有培養基和細胞因子成分，可從小鼠骨髓中產生未成熟和成熟的樹突狀細胞。

提供的試劑

該試劑盒包含以下優化的蛋白質和試劑，以促進小鼠單核細胞有效分化為樹突細胞。

小鼠樹突狀細胞基質培養基
重組小鼠GM-CSF
重組小鼠IL-4
重組小鼠TNF-α
紅細胞裂解緩沖液
重構緩沖區1

穩定性和儲存

將未開封的試劑盒存放在< -20 ° C。不要使用超過試劑盒的有效期。打開或重組的小鼠樹突狀細胞基質培養基，重組小鼠GM-CSF，重組小鼠IL-4或重組人TNF-α應在2-8 ° C無菌條件下儲存長達30天或-20 ° C 在手動除霜冰箱中保溫至-70 ° C，長可達3個月。打開的重構緩沖液1和紅細胞裂解緩沖液應在2-8 ° C無菌條件下儲存長達3個月。

數據

來自PBMC的小鼠樹突細胞的形態學。通過在CellXVivo TM小鼠單核細胞衍生的樹突細胞分化試劑盒中包括的試劑中培養5天，將小鼠PBMC分化成未成熟的小鼠樹突細胞。未成熟的樹突細胞表現出特征性的樹突細胞形態。

試劑盒衍生的成熟小鼠樹突狀細胞誘導同種異體T細胞的增殖。將經TNF-α處理的成熟樹突細胞的系列稀釋液與同種異體小鼠T細胞一起溫育3天。加入3 H-胸苷（3 H-TdR）培養后18小時。收獲細胞并使用閃爍計數器測量3 H-TdR的摻入。結果表示為一式三份的平均cpm。

培養的未成熟和成熟小鼠樹突狀細胞的表型分析。源自用CellXVivo ™小鼠樹突細胞分化試劑盒培養的骨髓細胞的未成熟樹突細胞（左，藍色）和TNF-α處理的成熟樹突細胞（右，紅色）用CD11c，B7的抗體染色用于流式細胞術。 -2 / CD86，MHC II類（IA / IE）或CD40（空心直方圖）。使用適當的同種型抗體（實心直方圖）作為對照。未成熟的樹突細胞具有CD11c +的表型，具有B7-2 / CD86，MHC II類的中間表達，并且幾乎沒有CD40。成熟的樹突細胞具有CD11c +的表型隨著B7-2 / CD86，MHC II類和CD40的表達增加。下圖中突出顯示了該圖中使用的所有R＆D Systems抗體和相應的目錄號。

準備和儲存