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scarabgenomics CRM197說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2018-12-06點(diǎn)擊次數(shù):3272

 

scarabgenomics CRM197說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品

CRM197-1,純化蛋白質(zhì),1毫克

CRM197-10,純化蛋白質(zhì),10毫克

CRM197-20,純化蛋白質(zhì),20毫克

  • 以經(jīng)濟(jì)的價(jià)格高純度CRM197 -金龜子的rCRM197是在我們的基因組清潔表達(dá)® 大腸桿菌,通過(guò)刪除基因組> 20%,可實(shí)現(xiàn)完整的超潔凈的蛋白質(zhì)通過(guò)生物工程。由于幾乎所有Scarab的CRM197都完好無(wú)損,因此您的半抗原不會(huì)浪費(fèi)。
  • 生物仿制藥天然CRM197 -的氨基酸序列,質(zhì)譜法,圓二色性,分析所有指示金龜子在我們的基因組清潔制成重組CRM197 ®大腸桿菌相當(dāng)于CRM197。
  • 共軛準(zhǔn)備 - Scarab的CRM197結(jié)合能力已通過(guò)定量功能測(cè)定證實(shí)
  • 超低內(nèi)毒素 - Scarab的工程化清潔基因組® 大腸桿菌具有簡(jiǎn)化的內(nèi)毒素,比標(biāo)準(zhǔn)表達(dá)菌株更容易去除。

背景

交叉反應(yīng)材料197(CRM197)是一種基因無(wú)毒形式的白喉毒素(DT)。CRM197中的單堿基變化(位置52處的谷氨酸至甘氨酸)使A鏈的ADP-核糖基化活性失效,減弱毒性1,2。盡管CRM197是無(wú)毒的,但它在免疫學(xué)上與白喉毒素?zé)o法區(qū)分。CRM197作為多糖和半抗原的載體起作用,使其在許多結(jié)合疫苗中具有免疫原性。

圣甲蟲(chóng)基因組學(xué)CRM197是重組形式的清潔基因表達(dá)® 大腸桿菌,我們的專有平臺(tái)。

SOURCE
清潔基因組® 大腸桿菌中表達(dá)的重組CRM197

產(chǎn)品分子量: 58.4 kDa

數(shù)據(jù)

 

圖1:Scarab Genomics的CRM197非常純凈,并且在批次之間保持一致。每批Scarab的CRM197的五個(gè)重復(fù)在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上運(yùn)行并用GelCode TM Blue染色,然后通過(guò)凝膠掃描評(píng)估純度。計(jì)算每批的平均純度并如下分配:圖A純度98.3%,圖B純度95.5%。

 

圖2:Scarab Genomics的CRM197純度高于其他商業(yè)來(lái)源。將來(lái)自每種來(lái)源的2微克CRM197在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上電泳并用GelCode TM Blue染色。Scarab產(chǎn)品中幾乎不存在分解產(chǎn)物(表示為A和B帶)。一些泳道中的被涂污的背景是由于蛋白質(zhì)降解和宿主蛋白質(zhì)的,兩者在Scarab產(chǎn)品中都是小的。泳道1大小標(biāo)記,泳道2空泳道3 Scarab Genomics CRM197,SG1泳道4 Scarab Genomics CRM197,SG2,Lane 5供應(yīng)商F,泳道6供應(yīng)商M和泳道7供應(yīng)商L.

 

圖3:Scarab CRM197的LC MS肽圖譜證實(shí)它與原生CRM197具有生物學(xué)相似性。在Scarab的高純度CRM197上進(jìn)行氨基酸測(cè)序和質(zhì)譜(MS)。MS材料的廣泛生物信息學(xué)分析顯示沒(méi)有翻譯后修飾。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化后接著納米液相色譜-MS / MS鑒定出非常高的蛋白質(zhì)覆蓋率(~97-98%)。Scarab CRM197上的電噴霧電離質(zhì)譜(ESI-MS)證實(shí)了預(yù)期的肽序列。沒(méi)有觀察到與報(bào)道的氨基酸組成和側(cè)鏈修飾的差異。

 

圖4:圣甲蟲(chóng)的CRM197結(jié)合有效。并非CRM197中的所有賴氨酸都暴露在蛋白質(zhì)表面上以進(jìn)行潛在的綴合。采用Solulink的ChromaLink™生物素結(jié)合測(cè)定(San Diego,CA),利用NHS酯反應(yīng)方案將生物素與伯胺結(jié)合,我們證實(shí)Scarab的CRM197上至少有10個(gè)位點(diǎn)可用于結(jié)合。這種光學(xué)定量(在354nm處的吸光度)功能測(cè)試證實(shí),Scarab的CRM197上的賴氨酸可與半抗原結(jié)合,如天然CRM197。

產(chǎn)品規(guī)格

質(zhì)量控制

純度:

通過(guò)SDS-PAGE檢測(cè)≥95%CRM197

A鏈和B鏈含量≤總CRM197的5%

濃度:

在150mM NaCl,25mM HEPES,pH7.4中4mg / mL,通過(guò)280nm處的吸光度,使用E0.1%= 1.07對(duì)1mg / mL溶液

內(nèi)毒素:

通過(guò)動(dòng)態(tài)濁度LAL法≤25EU/ mg蛋白質(zhì)(大靈敏度= 0.01 EU / mL)

二聚體:

≤5%

等級(jí): CRM197僅供研究使用,不適用于人類(lèi)或診斷代理。

儲(chǔ)藏條件:

  • CRM197是0.2μm過(guò)濾的4mg / mL CRM197,150mM NaCl,25mM HEPES,pH7.4的冷凍溶液。收到后儲(chǔ)存在-70°C。
  • 為了使聚集小化,將CRM197在37°C水浴中解凍1小時(shí)。
  • 重復(fù)的凍融循環(huán)會(huì)降解材料。為了大限度地減少凍融循環(huán),將CRM197等分以匹配所需的用途。
  • 輕輕處理產(chǎn)品,不要VORTEX

 

 

 

 

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