PolyPlus-transfection（PT）是一家位于法國的生物技術公司，目前已經通過了ISO9001:2000質量體系認證。該公司擁有十幾年的的轉染試劑研發(fā)經驗，已經開發(fā)了一系列的轉染試劑，如：基因的體內和體外轉染試劑、寡核苷酸轉染試劑和siRNA轉染試劑等，可以根據不同的需要獲得穩(wěn)定或瞬時的轉染效果

PolyPlus jetCRISPR產品

jetCRISPR™

用于基因組編輯的RNP轉染試劑

• 專為Cas蛋白（Cas9，Cpf1）設計并指導RNA遞送
• 基因組編輯效率高
• 出色的細胞活力和形態(tài)
• 快速可靠的基因編輯
• 易于使用：反向和正向協(xié)議

技術指標

摘要

CRISPR / Cas工程核酸酶系統(tǒng)是功能強大且高度特異性的基因組編輯工具。CRISPR / Cas是具有指導RNA（gRNA）分子的兩組分系統(tǒng)，該分子驅動Cas核酸酶（Cas9，Cpf1）到基因組內的特定目標序列，以引入遺傳修飾（突變，插入或缺失）。

jetCRISPR™是一種創(chuàng)新試劑，專門設計用于在CRISPR / Cas9和CRISPR / Cpf1實驗中提供RNP。jetCRISPR™帶來了很高的CRISPR基因組編輯效率，同時保持了出色的細胞活力和轉染后的形態(tài)。使用先進的技術進行CRISPR / Cas9和CRISPR / Cpf1 RNP遞送！

訂購信息

1.5 ml jetCRISPR™轉染試劑足以執(zhí)行約 在6孔板中進行300次轉染。

高基因組編輯效率

jetCRISPR™是專為RNP（指導RNA和Cas9蛋白復合物）的高轉染效率而設計的，因此可在不同細胞類型中的多種靶標上實現cas9介導的高基因組編輯效率（圖1和2）。

圖1：在HeLa細胞中使用jetCRISPR™實現高基因組編輯效率。在96孔板的每孔中，使用幾種RNP濃度的SpCas9核酸酶和HPRT1 sgRNA或陰性對照與0.3 µl jetCRISPR™試劑結合在HeLa細胞中進行RNP轉染。在48小時后轉染，T7消化產物在2％瓊脂糖凝膠上運行，并與由G顯示BET染色：箱透（Syngene公司^®）。收購均與Genesnap軟件進行（Syngene公司^®）和INDEL的量化用的Genetools軟件（Syngene公司執(zhí)行^®）。1：1083 bp的未切割片段； 2：827 bp的長切割片段； 3：256 bp的短切割片段。

jetCRISPR™轉染試劑的基因編輯效率比其他競爭對手更高，這使其成為CRISPR應用的優(yōu)選產品。

圖2：在用陽離子脂質體比較jetCRISPR™獲得了優(yōu)異的基因組編輯效率^® CRISPRMAX™。RNP轉染的A549和用30nM的RNP（SpCas9核酸酶和HPRT1因組）與jetCRISPR™試劑的0.3微升或0.3微升的Lipofectamine HEK-293細胞中進行^® CRISPRMAX™，每一個96孔板的孔。轉染后48小時，通過使用T7核酸內切酶方法計算INDEL的百分比（％）來評估基因組編輯。該INDEL％是通過使用Genetools軟件（Syngene公司確定^®）。

出色的細胞活力

在Polyplus-transfection中，我們很自豪能使用對細胞極為溫和的試劑，在整個實驗過程中保持出色的細胞活力和形態(tài)。jetCRISPR™與血清和抗生素均兼容，因此可以在健康細胞的宜條件下進行RNP轉染（圖3）。

圖3：jetCRISPR™轉染后48小時的細胞活力和形態(tài)極棒。使用30 nM RNP（SpCas9核酸酶和HPRT1 sgRNA）在96孔板的每孔中用0.3 µl jetCRISPR™試劑對HEK-293和A549細胞進行RNP轉染。在48小時后轉染，細胞形態(tài)由相襯ZOE熒光細胞成像可視化（BIORAD ^®）。

快速可靠的基因編輯

直接將Cas9作為蛋白質而不是質粒進行傳遞，可以輕松進行基因組編輯，因為該蛋白質易于使用。使用jetCRISPR™傳遞Cas9蛋白和gRNA可以實現快速可靠的基因編輯（圖4）。此外，Cas9蛋白從細胞中清除的速度將比質粒更快，因此可將脫靶效應降至低，并實現更具體的基因組編輯（Kim S等人；Genome Research 2014； 24：1012-1019）。

圖4：用jetCRISPR™獲得的HEK-293細胞快速，可靠的基因編輯效率。使用30 nM RNP（Cas9蛋白和HPRT1 sgRNA）在96孔板中每孔加0.3μljetCRISPR™試劑在HEK-293細胞中進行RNP轉染。通過使用T7核酸內切酶方法計算INDEL的百分比（％），可以在不同時間點評估基因組編輯。該INDEL％是通過使用Genetools軟件（Syngene公司確定^®）。

易于使用

jetCRISPR™是作為即用型解決方案提供的。現在，轉染RNP是一個非常簡單的過程，只需幾個步驟：形成RNP復合物，添加轉染試劑并添加到孔中！

反向轉染和正向轉染都非常適合與jetCRISPR™一起使用，因此使您可以調整方案以適合您正在處理的細胞，板的形式以及分析時間。通過使用反向協(xié)議（圖5），數據將比使用正向協(xié)議的日期早一天。

圖5：jetCRISPR™反向方案

影片

技術支持專家Alengo Nyamay'antu（PhD）介紹了基因組編輯中的轉染趨勢。她概述了將引導RNA和Cas9核酸酶同時傳遞到細胞中的解決方案。