viennalab IL28B RealFast檢測產(chǎn)品

IL28B RealFast™ Assay

該IL28B RealFast™檢測有助于預(yù)測抗病毒治療和丙型肝炎病毒（HCV）感染患者持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）的成功。

HCV治療的效率

• 聚乙二醇化干擾素/利巴韋林（pegIFN / RBV）療法通常用于治療HCV感染
• SVR取決于病毒基因型，還取決于患者的因素，包括遺傳多態(tài)性
• IFNL4基因中的rs368234815 TT>ΔG變異是預(yù)測HCV清除率的已知強(qiáng)宿主因子
• rs368234815 TT>ΔG的基因分型有助于預(yù)測pegIFN / RBV治療的結(jié)果，而與患者種族無關(guān)

產(chǎn)品詳情

IL28B RealFast™檢測

7-200 7-203

一。預(yù)期用途

IL28B RealFast™檢測是一種快速、準(zhǔn)確的實(shí)時(shí)PCR檢測方法，用于檢測

人干擾素lambda 4（ifnl4）基因/假基因，位于白細(xì)胞介素28b（il28b）基因上游。遺傳

有助于預(yù)測丙型肝炎病毒（HCV）感染患者的治療反應(yīng)，這些患者正在考慮接受聚乙二醇干擾素/利巴韋林（PEGIFN/RBV）治療。有利tt等位基因的純合攜帶者傾向于高達(dá)3倍

持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）比∏G等位基因攜帶者。在人類DNA提取液中，定性分析鑒別出

可能與高（TT/TT）或低（TT/△G和△G/△G）治療相關(guān)的IFNL4 TT>ΔG基因型——誘導(dǎo)或自發(fā)清除HCV。

參考序列：HGVS:NG U 042193.1:G.1457 U 1458;Delaainsc；NCBI DBSNP:RS368234815。

2.介紹

慢性丙型肝炎病毒感染影響了大約3%的世界人口，是肝硬化、肝癌和肝移植的主要原因。

推薦的pegifn/rbv標(biāo)準(zhǔn)療法的成功與否取決于病毒和宿主因素。患者感染不利

1型或4型hcv的svr低于2型或3型hcv感染者。影響治療反應(yīng)的宿主因素包括年齡、性別

影響抗病毒活性的種族和遺傳多態(tài)性。ifnl4 rs368234815 t t>.-g變體與rs12979860 c>t緊密相關(guān)，

長期治療成功的標(biāo)志。幾項(xiàng)研究表明rs368234815是il28b的功能變異

mrna調(diào)節(jié)，與rs12979860相比，作為svr和hcv清除的更好預(yù)測因子，尤其是在非洲患者中

祖先。IFNL4基因型TT/TT有利于HCV患者自發(fā)和治療誘導(dǎo)的病毒清除，主要是在那些

感染1型或4型。

三。套件內(nèi)含物100/32 RXN

realfast™2x基因分型混合物1瓶白色瓶蓋1000/320微升

IL28B分析混合物1瓶紫色瓶蓋550/550微升

IL28B TT/TT對(duì)照品1瓶綠蓋75/75微升

IL28B∏g/∏g-對(duì)照品1瓶紅蓋75/75微升

該試劑盒包含終體積為20微升的100/32反應(yīng)試劑

每一個(gè)。

realfast™2x基因分型混合物包括hotstart taq

優(yōu)化緩沖體系中的dna聚合酶和dntps。IL28B分析混合物由IFNL4基因特異性引物和兩個(gè)等位基因特異性雙標(biāo)記水解探針組成。

試劑盒中提供了代表il28b tt/tt和∏g/∏g基因型的對(duì)照品。

四。儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

IL28B RealFast™分析用冷卻塊裝運(yùn)。到達(dá)后，將試劑盒保存在-20°C。或者，將試劑盒保存在2到8°C，以便在

一個(gè)月。該試劑盒可承受20次冷凍/解凍循環(huán)，且無活性損失。避免長時(shí)間暴露在強(qiáng)光下。如果存儲(chǔ)正確，

試劑盒將保持完整的活性，直到標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期為止。5個(gè)。產(chǎn)品描述

5.1。試驗(yàn)原理

該試驗(yàn)基于熒光5'核酸酶分析，也稱為Taqman®分析。每個(gè)反應(yīng)都包含一對(duì)基因特異性引物

它放大了ifnl4基因的110bp片段，以及兩個(gè)雙標(biāo)記的等位基因特異性水解探針

擴(kuò)增片段的序列。5’熒光探針和3’-猝滅染料在完整探針上的接近阻止了記者

從熒光中。在聚合酶鏈反應(yīng)的延伸階段，taq dna聚合酶的5'-3'外切酶活性能裂解5'-熒光

雜交探測器的記者。熒光團(tuán)與猝滅染料的物理分離實(shí)時(shí)產(chǎn)生熒光信號(hào)，熒光信號(hào)與累積的pcr產(chǎn)物成正比。

在純合tt/tt樣本中，hex標(biāo)記的tt探針與基因片段的互補(bǔ)鏈雜交。強(qiáng)壯的

在hex通道（556nm）中檢測到熒光信號(hào)，在fam通道（520nm）中沒有或僅檢測到基線信號(hào)。反之亦然，在

純合子∏g/∏g樣本fam標(biāo)記的∏g探針與基因片段結(jié)合。fam中檢測到強(qiáng)熒光信號(hào)

在十六進(jìn)制通道中沒有或只有一個(gè)基線信號(hào)。在雜合子樣本中（TT/△G），兩個(gè)探針都與擴(kuò)增子結(jié)合，并且

在兩個(gè)通道中生成中間信號(hào)。

5.2。實(shí)時(shí)PCR儀器兼容性

IL28B RealFast™分析經(jīng)驗(yàn)證可與AB 7500快速儀器一起使用。

該試劑盒與能夠記錄FAM和HEX熒光的各種通用實(shí)時(shí)PCR儀器兼容：

使用AB StepOne™時(shí)，將被動(dòng)參考染料設(shè)置為“Rox”！提供的套件不含ROX。用于需要高rox的實(shí)時(shí)pcr儀器，用于數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化（例如

Biosystems®儀器：StepOne™，7300，7900/7900ht），在2X基因分型混合物中添加終濃度為1μm的RoX。

5.3條。分析性能規(guī)范

il28b realfast™分析和檢測高度連鎖rs12979860 c>t多態(tài)性的參考試劑盒顯示99,4%

84份樣品基因分型結(jié)果的一致性。

在168個(gè)等位基因中，IL28B realfast™分析鑒定出113個(gè)有利TT和55個(gè)不利∏G等位基因，而參考試劑盒鑒定出

114個(gè)有利c等位基因和54個(gè)不利t等位基因。對(duì)一個(gè)不一致的樣本進(jìn)行測序后發(fā)現(xiàn)，存在∏g等位基因，但不存在

與一條染色體上的rs12979860 t等位基因相關(guān)。

IL28B RealFast™檢測的敏感性和特異性分別顯示真陽性和真陰性。

檢測限：0.2ng基因組dna（每次反應(yīng)）。建議DNA濃度：2至20 ng/μL基因組DNA。6.需要但未提供的材料

帶FAM（520 nm）和HEX（556 nm）過濾器的實(shí)時(shí)PCR儀器，儀器兼容的反應(yīng)容器，一次性無粉末

手套、渦流器、2.0毫升試管的微型離心機(jī)、試管架、一套校準(zhǔn)的微量移液管（0.5–1000微升）、帶氣溶膠屏障的無菌針頭

過濾器，分子級(jí)水，DNA提取系統(tǒng)，冷凍柜，生物危害廢物容器。